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尾型同源盒转录因子2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其转染对结肠癌细胞生长的影响

   
@article{PW3965,
	author = {训凯 王 和 见宝 郑 和 学军 孙 和 孝珑 王 和 钧辉 余 和 孝斌 李},
	title = {尾型同源盒转录因子2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其转染对结肠癌细胞生长的影响},
	journal = {中国普通外科杂志},
	volume = {25},
	number = {4},
	year = {2016},
	keywords = {},
	abstract = {目的：构建尾型同源盒转录因子2（CDX2）shRNA慢病毒表达载体，并观察下调CDX2基因其对结肠癌细胞生长的影响。方法：根据CDX2 mRNA序列设计shRNA，并合成shRNA的互补序列，通过连接酶链接到GV248载体上，用测序方法鉴定阳性克隆后，将构建好的慢病毒表达载体与慢病毒包装载体用Lpofectamine 2000共转染293T细胞，产生慢病毒颗粒并用稀释法进行滴度测定。将CDX2 shRNA慢病毒表达载体转染人结肠癌细胞SW480、HT29后，分别用qRT-PCR和Western blot检测CDX2 mRNA及蛋白水平，CCK8实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力。结果：DNA测序鉴定证实，CDX2 shRNA表达片段正确插入GV248载体中，包装后的病毒滴度为1×109 TU/mL；SW480、HT29细胞转染CDX2-shRNA慢病毒表达载体后，CDX2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低（均P0.05）。结论：成功构建shRNA慢病毒表达载体，其转染结肠癌细胞后能有效地抑制CDX2基因的表达；下调CDX2基因对人结肠癌细胞的增殖无明显影响。
},
	url = {https://pw.amegroups.com/article/view/3965}
}